期刊简介
《中华神经外科杂志》经过23年的发展，期刊的学术水平处于国内医学类期刊的领先地位，真正成为了中国神经外科学术水平的展示窗口，真正成为了中国神经外科医师的学术交流平台。根据“中国科技期刊引证报告”，本刊各项学术指标4年来连续攀升（表1）。影响因子在神经精神类期刊中排名第一，在所有医学类期刊中排名第五。中华神经外科杂志是我国神经外科创刊最早的专业杂志，目前已成为此领域最高级的核心期刊，全国13000余名专业医生50%以上都订阅本杂志，其发行量在同类杂志中始终保持第一。
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首页>中华神经外科杂志
- 杂志名称：中华神经外科杂志
- 主管单位：中国科学技术协会
- 主办单位：中华医学会
- 国际刊号：1001-2346
- 国内刊号：11-2050/R
- 出版周期：月刊
期刊荣誉：1997年中国科协优秀科技期刊二等奖期刊收录：CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 万方收录(中), 国家图书馆馆藏, 维普收录(中), JST 日本科学技术振兴机构数据库(日), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊)
重组质粒pcDNA3.1 his-hTH与pEGFP-C2共转染骨髓基质细胞源神经干细胞的实验研究
徐强；徐如祥；姜晓丹；潘力；张世忠；郭再玉
关键词：hTH基因, 骨髓基质细胞源神经干细胞, NucleofectorTM核转染仪, 共转染, 恒河猴
摘要：目的构建携带人酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)目的基因片段的真核表达重组质粒-pcDNA3.1his-hTH,与pEGFP-C2共转染恒河猴骨髓源神经干细胞,观察hTH基因在骨髓源神经干细胞中的表达情况.方法应用基因重组技术,将pWAV2-TH中TH基因亚克隆到pcDNA3.1his真核表达载体,以酶切和测序方法鉴定重组质粒pcDNA3.1his-hTH的正确性;将pcDNA3.1his-hTH和pEGFP-C2经电击穿孔法共转染恒河猴骨髓源神经干细胞,24h后观察EGFP瞬时表达情况,10d后进行hTH基因RT-PCR,以及hTH和6His单克隆抗体的免疫组化检测.结果(1)酶切和测序结果均证实pcDNA3.1his-hTH的正确性;(2)细胞转染24h后,荧光显微镜下可观察到EGFP的表达,80%以上细胞发出绿色荧光;10d后RT-PCR检测到细胞内有hTH基因的表达,免疫组化结果显示细胞有hTH和6His抗原表达.结论成功构建的pcDNA3.1his-hTH和pEGFP-C2能够共转染恒河猴骨髓源神经干细胞,hTH、EGFP和6His基因在细胞内有效表达.该系统可以作为体外检测转染率、细胞移植治疗帕金森病活体跟踪移植细胞的技术平台.
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